1、flag标签作用

   Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。 FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点: · FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。 · 融合FLAG的目的蛋白,可以直接通过FLAG进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白,并且纯化效率高。 · FLAG作为标签蛋白,其可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。 · 融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。 希望对你有帮助哦~^^~ flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。 选择flag标签抗体,主要根据实验的需要。一个抗体检测后应用类型越多,使用中选择余地就越大。要综合考虑抗体,特异性,稳定性,效价等等因素

2、带表位标签Flag的重组蛋白请问怎么纯化

   一般用FLAG标签抗体偶联介质或者磁珠进行蛋白的纯化。 flag标签一般不影响细胞定位的,这个蛋白本身的细胞定位是哪里,融合之后还是哪里啊。

3、蛋白纯化的原理是什么?

   蛋白质分离纯化常用方法有: 、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析: ,利用蛋白质的两性游离 ni柱中的氯化镍可以与有his(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。 步骤是:过柱子前可以选择ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡mm %乙醇保存柱子就可以咯~ 过的蛋白用不同的管子收下,然后sdspage检测在哪个管子里。

4、flag-tagged 蛋白是什么?是做什么实验用的?

   是一种标签 多用于蛋白检测或者纯化 搜一下:flagtagged 蛋白是什么?是做什么实验用的?